Jaké jsou standardy pro elektroforetické zpracování?

Jaké jsou standardy pro elektroforetické zpracování?

Základním principem elektroforézy je, že se týká procesu migrace nabitých částic působením elektrického pole. Mnoho důležitých biomolekul, jako jsou aminokyseliny, peptidy, proteiny, nukleotidy, nukleové kyseliny atd., má ionizovatelné skupiny, které mohou nést pozitivní nebo negativní náboje při specifické hodnotě pH. Působením elektrického pole se tyto nabité molekuly budou pohybovat ve směru elektrody opačném k polaritě jejich náboje.

Elektroforetická dovednost je schopnost separovat, určovat nebo čistit vzorky s využitím elektrického pole, které způsobuje, že se nabité molekuly pohybují různými rychlostmi v důsledku rozdílů v nabitých vlastnostech různých molekul ve vzorku, který má být separován, a také rozdílů. ve velikosti, tvaru a dalších vlastnostech samotných molekul. Proces elektroforézy je třeba provádět v podpůrném médiu. Elektroforéza s volným rozhraním, kterou provedli Tiselius et al. v roce 1937 neměl pevné nosné médium, takže rozptyl a konvekce byly poměrně silné, což ovlivnilo separační efekt. Představuje tedy elektroforézu s pevným nosným médiem, kdy vzorek prochází procesem elektroforézy v pevném prostředí, čímž se snižuje interference disperze a konvekce.

Výchozími nosnými médii byly filtrační papír a membrána z acetátu celulózy, které jsou v současnosti v laboratořích méně používané. Po dlouhou dobu byly látky s malými molekulami, jako jsou aminokyseliny, peptidy, cukry atd., obvykle separovány a analyzovány elektroforézou za použití filtračního papíru nebo celulózových nebo silikagelových tenkovrstvých desek jako média. V současnosti se však pro analýzu obvykle používají aktivnější techniky, jako je HPLC. Tato média jsou vhodná pro separaci látek s malými molekulami s jednoduchým a pohodlným ovládáním. Separační účinek neuspořádaných biomolekul je však relativně slabý. Zavedení gelu jako podpůrného média značně podpořilo rozvoj dovedností elektroforézy, díky čemuž se dovednosti elektroforézy staly jednou z důležitých technik pro analýzu biologických makromolekul, jako jsou proteiny a nukleové kyseliny.

Elektroforetické zpracování není obtížné, ale také musíme vědět, že existují určité standardy pro elektroforetické zpracování, jinak nevíme, zda je kvalita kvalifikovaná. Jaké jsou tedy normy pro toto elektroforetické zpracování?

1. Hladký povrch

Toto je základní podmínka, pokud povrch není hladký, pak je základní kvalifikace ztracena;

2. Jednotná tloušťka

Elektroforetické zpracování vyžaduje zajištění jednotné tloušťky, aby se zabránilo vzniku barevných rozdílů;

3. Žádné zjevné praskliny na povrchu